1.病原诊断 从粪便内检查
虫卵或孵化毛蚴以及直肠粘膜活体组织检查虫卵。有:⑴直接涂片法:重感染地区病人粪便或急性
血吸虫病人的粘液血便中常可检查到血吸虫虫卵,方法简便,使虫卵
检出率低。⑵毛蚴孵化法:可以提高阳性检出率。⑶定量透明法:用作血吸虫虫卵计数。⑷直肠粘膜活体组织检查:慢性及晚期血吸虫病人肠壁组织增厚,虫卵排出受阻,故粪便中不易查获虫卵,可应用直肠镜检查。 2.免疫诊断 ⑴皮内试验(intradermaltest,IDT):一般皮内试验与粪检虫卵阳性的符合率为90%左右,但可出现假阳性或假阴性反应,与其他吸虫病可产生较高的交叉反应;并且病人治愈后多年仍可为阳性反应。此法简便、快速、通常用于现场筛选可疑病例。 ⑵检测抗体:血吸病人血清中存在特异性抗体,包括IgM、IgG、IgE等,如受检者未经病原治疗,而特异性抗体呈阳性反应,对于确定诊断意义较大;如已经病原治疗,特异性抗体阳性,并不能确定受检者体内仍有成虫寄生,因治愈后,特异性抗体在体内仍可维持较长时间。目前检测抗体的血吸虫病血清学诊断方法很多,常用的有以下几种:1)环卵沉淀试验(circunoval precipitintest,COPT):通常检查100个虫卵,阳性反应虫卵数(环沉率)等于或 大于5%时,即为阳性。粪检血吸虫卵阳性者,COPT阳性率平均为97.3%(94.1%~100%)。2)间接红细胞凝集试验(indirect haemagglutinationtest,IHA):粪检血吸虫虫卵阳性者与IHA阳性符合率为92.3%~100%,正常人假阳性率在2%左右,与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫感染者可出现假阳性反应。IHA操作简便,用血量少,判读结果快,目前国内已广泛应用。3)酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA):此试验具有较高的敏感性和特异性,并且可反应抗体水平,阳性检出率在95%~100%,假阳性率为2.6%,病人在吡喹酮治疗后半年至一年有50%至70%转为阴性。4)免疫酶染色试验(immunoenzymic stainingtest,IEST)。 值得提出,近年来随着科技的发展,某些高科技和新方法被逐步引用到血吸虫病的诊断和研究领域。例如免疫印渍技术(immunoblotting)又称(western blot),是在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定的基础上建立的一种具有分子水平的免疫学新技术,有力推动了血吸虫病血清学诊断方法的进展,它不但能对血吸虫抗原的限定组分蛋白进行分析和鉴定,而且能用以诊断病人和区分血吸虫病不同病期的新型血清学诊断方法。又如杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)的应用。采用特异的McAb纯化血吸虫抗原,用于血吸虫病血清学诊断;也可应用McAb检测循环抗原,为血吸虫病诊断提供新的途径。 ⑶检测循环抗原:由于治疗后抗体在宿主体内存留较长时间,其阳性结果往往不能区分现症感染和既往感染,也不易于评价疗效。循环抗原是生活虫体排放至宿体内的大分子微粒,主要是虫体排泄、分泌或表皮脱落物中具有抗原特性,又可为血清免疫学试验所检出。◆
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(
1
)粪检:从粪便中检出血吸虫虫卵或孵出毛蜘是确定诊断和考核疗效的最可靠的指标。粪检虫卵方法简便易行,但在轻度感染者、晚期患者和经治疗未愈者粪便中虫卵数很少,检出率不高,故粪检虫卵阴性不能排除血吸虫感染。粪检虫卵(毛勤)有定性检查法和定量检查法。①
定性检查:A
.直接涂片镜检法:检出率低,只在感染严重的早期患者可检出虫卵;B
.集卵镜检法:有自然沉淀法、汞醛碘沉淀法和尼龙袋集卵法等。自然沉淀法:较直接涂片镜检法检出率稍高。尼龙袋集卵法:将粪便匀浆滤去粗渣后,置双层尼龙袋(内层120
目,外层2
印目)内淘洗或在水龙头下冲洗,然后收集2
印目尼龙袋内的粪渣镜检。本法较沉淀法简便易行,检出率高,便于流动性普查;C
.孵化法:是根据血吸虫卵内的毛蜘在适宜条件下能很快孵出,并游动于水表面下的特性。方法是取受检粪便约309
,先经沉淀法浓集处理,将处理后的沉渣倒人500
血的三角烧瓶中,加清水至瓶口处,置于20
一30
℃
下进行孵化,在4
、12
、24
小时时,用肉眼或放大镜各观察一次结果。如见水面下有白色点状物作直线来往游动,即为毛坳阳性。采用塑料杯顶管改良法,可使虫卵散失少,毛坳集中便于观察,检出率较三角烧瓶法为高。为提高粪检虫卵的阳性率,最好选用集卵镜检和粪渣孵化两种方法同时进行检查;送检粪量及送检次数与检出率密切相关,送检的次数越多、粪量越大,检出率越高。在血吸虫病流行地区,提倡“一送三检”(留一次全量粪便,分三次检查)或“三送三检”(每次检309
粪便,送检三次),均可明显提高虫卵检出率。②
定量检查:患者每日从粪便中排出的虫卵数与其体内寄生的雌虫数相关,故虫卵的定量在一般情况下可反映出宿主的感染度。粪便中的虫卵定量可采用加藤(Kato
一kats
)集卵透明法,以50mg
粪便中的虫卵数为计算单位;少于100
为轻度感染,100
一中阅为中度感染,多于叨O
为重度感染。(
2
)直肠粘膜活组织检查:用乙状结肠镜或直肠镜观察直肠粘膜的病变;急性期以肠粘膜充血、水肿为主,慢性期时肠粘膜苍白、肥厚及瘫痕形成。各期均可见典型的小斑点或小结节。将夹取疑有虫卵结节的米粒大小粘膜组织,压于两载玻片之间镜检。本法检出血吸虫卵的阳性率很高。对未经治疗的病人,检出的虫卵不论死、活卵均有确定诊断价值;对经特效药物治疗过的病人,则只有检出活卵或近期变性卵才有诊断、治疗意义。活检时要细心操作,以防发生肠大出血或肠穿孔,尤其对晚期血吸虫病患者更应小心操作。
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