精子分析仪计算模式：
精子自动编号标注与统计：精子全自动分析软件对精子图像数学形态化识别后自动分配编号。每个精子有一个独立编号，然后对其运动轨迹进行精确跟踪识别，以取得比较精确的运动参数和统计学参数。
软件采用自动识别模式与精确识别双模式，大大提高精确度。
自动模式:在识别训练获得的最优参数数据基础上直接识别。
精确模式:在多次自动识别训练及参数调整后，自动识别过程中仍出现个别误识别或遗漏识别时，可自动对误识别剔除或对遗漏补进,屏幕视野识别率可达100%，实现精确识别与准确跟踪。
计数板要达到以下要求：
精子成像清晰,针对不同物种精子大小,计数池深度形成单层、独立的精子细胞，不发生重叠，堆积等现象，使精子在同一焦面上清晰成像，同时又不影响精子水平方向的自由运动。针对计算机辅助精液分析（CASA）应用进行设计和定标，符合国际CASA标准和国际OIE标准应用要求。
MAKLER 精子计数板使用说明书
一、描述：
Makler 精子计数板(腔室)是一种方便精子计数的设备，用于快速精确的精子计数、活动性和形态学评价，可使用未稀释的样品。 计数板包括两个部分：
1. 下面的主要部分有一个金属基底(A)和两个把手(H)。在基底的中心有一个光学平玻璃制的平盘(D)，样品放置其上。在平盘周围有四个针(P)。他们的尖端比平盘高10微米。
2. 上面部分是覆盖玻璃(C)被一个金属环环绕。在他的下表面中心有一个 1 mm平方的格子，被分成100个方格，每个是0.1 mm × 0.1mm 。当覆盖玻璃放置在四个针上时，在一行上的10个方格包围的空间就是一毫升的百万分之一。因此，在10个方格里的精子头数量代表着他们以 百万/mL 为单位的浓度。 二、腔室的准备：
在把样品放在平盘上之前，确保相对表面彻底清洁且无尘，因为大多数颗粒的尺寸大于玻璃间的狭小空间。为了此目的，用镜头纸擦两个表面。清洁度可以通过把覆盖玻璃放置到四个针上，观察四个接触点彩色边纹(Newton现象)来检查。对着荧光灯可以看到最好的效果。 三、精液分析的方法：
充分混合样品，注意避免产生气泡。通过木棒或移液器的帮助，在平盘中心区域放置一小滴。用手指拿起覆盖玻璃黑色点的相反面，并立即放在四根针上。轻柔按下，再次观察彩色边纹。液滴会在平盘的整个区域扩散成厚度10微米的薄层。
只要针没有被淹没，多余的不会影响正常的分析。一旦覆盖玻璃就位，避免触摸、抬起以及再次覆盖。因为这会改变腔室内精子的平均分布。用把手拿起腔室并放置在显微镜平台上。可能需要用腔室夹头来进行固定。
四、特别注意事项
1，绝对不要对此腔室使用40× 物镜。这样盖玻片在聚焦时会被破坏。 2，即使使用合适的20× 物镜，也要小心不要压到覆盖玻璃上。 一般当物镜末端距离表面1mm的时候，图像是清晰的。如果因为不正确的使用显微镜导致覆盖玻璃损坏，我们不会负责。
3，推荐使用20× 物镜和10× 目镜。不推荐使用10× 物镜，因为精子看起来会太小，除非用20× 目镜。 五、精子计数：
如果精子太密集和活动，他们首先需要被固定。这很容易做到，通过把样品一部分转移到另一个测试管。然后测试管插入50℃-60℃热水中，大约5分钟。一滴充分混合的，预热的样品放置在腔室上并盖上覆盖玻璃。在格子的方格里精子头被计数，与血液学中计数血细胞的方法一样。
在此精子的数量是最重要的，在连续一列10个方格里对其计数。数量代表了以 百万每毫升为单位的浓度。在其他一列或两列里重复此操作，以测定平均值。可以选择用其他2或3滴样品进行计数以提高计数的可靠性。在精子缺乏症样品中，推荐在整个格子区域计数。
在精子聚焦之后，移动显微镜平台把各自定位在视野中心。然后，调节腔室以使格子线处于水平和垂直位置。
在此搜索期间你可能会观察到：
<!--[if !supportLists]-->A)<!--[endif]-->精子分别是否均匀？如果不是，样品没有混合好。
<!--[if !supportLists]-->B) <!--[endif]-->是否所有精子都在一个聚焦平面，没有模糊？如果不是，可能表面没有清洁或两个表面之间有大的颗粒。 任意情况，都要从开始重复。 六、活动性评价：
推荐在样品准备好3-5分钟之内进行活动性评价，以避免从周边移动过来的精子的干扰。计数9或16格内所有不能动的精子。然后计数相同区域内能动的精子且评估移动等级+1到+4. 在格子的另一个区域重复此过程，以及另外3到4滴样品并计算平均值。
这样的评估比原始载玻片上的要精确很多，因为那里精子被盖玻片压缩且活动性被损害。Makler精子计数板提供了标准条件，对所有分析样品精子都可以在一个光滑的水平面自由移动。 七、形态学：
快速精子形态学评价可以从一个湿的未染色的样品进行，其包含固定的精子。推荐使用一个相差显微镜。在格子的一个特定区域计数所有正常和不正常精子，且从其他样品重复此过程以达到总计数200。显然，精子缺乏症样品扫描的精子数可以更低。腔室不适合染色的，干的样品进行形态学测定。 八、特殊情况：
气泡：格子区域如果出现气泡，推荐换一滴样品，除非气泡非常小，不影响分析。
大的灰尘颗粒，纤维等，也会通过改变空间大小来影响计数，也应该更换一滴样品。如果样品没有混合完全，高度粘稠，或腔室有颗粒或灰尘；在同一样品不同滴之间计数会出现较大差别。
凝聚：在腔室里有时周围的精子会聚集，如果在计数之前过去了太久。这种情况下，更换此滴样品为适当混合的新样品。在个别情况下，在格子区域内会出现胶状聚集，此时应更换样品。
结晶：样品时间过长可能包含晶体，可能不会影响计数，但使计数更困难。有时候，这些晶体太大，可能会损坏表面区域。因此，分析包含晶体的样品时需特别注意。
九、为了重复使用的清洗和准备：
不要用自来水淋洗或浸泡腔室。把刷子蘸水或非腐蚀性杀菌溶液，并擦玻璃的两个面。然后，挤压刷子擦掉剩下的水。最后用无毛镜头纸擦干表面，尽量避免触摸针的尖端。腔室现在可以重复使用了。
一般来说，一旦检查固定，不需要改变聚焦。无需提高物镜，简单的把腔室滑进滑出即可。 十、附 件：
<!--[if !supportLists]--><!--[endif]-->清洁刷 <!--[if !supportLists]--><!--[endif]-->无毛镜头纸 <!--[if !supportLists]--><!--[endif]-->腔室夹头——在精
子分析期间此设备应该被放置在显微镜平台上。紧紧夹住腔室使之可以在平台上平滑移位。当精子分析结束，握住夹头把腔室滑出。要进行新的精子分析，再次把腔室滑进夹头。 <!--[if !supportLists]--><!--[endif]-->英文说明书
(1)精液量 一般猪场或人工授精站常用电子天平称量精液，以每克1毫升计。通常1头公猪一次采精量滤除胶状物后，成年公猪的为200～300毫升，有的高达700～800毫升。公猪的射精量应该以一定时间内多次采精量的平均值为准。量太少说明采精方法不当、采精次数过多或生殖器官机能衰退量太多说明副性腺分泌物多或混入水、尿等异物。公猪射精量以一定时间内多次采精量平均值为准。(2)精液的颜色 正常精液的颜色为乳白色、奶白色或浅灰白色。精液浓度高时为乳白色，浓度低时为灰白、水样甚至透明。精子的密度越大、颜色越白，密度越小则越淡。如果精液中带有血丝或颗粒状黄白点(经常粘附在滤纸上)则表示精液中有炎症物，不能使用精液若呈淡绿色则混有脓液，呈黄色混有尿液，呈红褐色混有血液。有血往往是在采精时伤及公猪的生殖器官而引起的，而出现尿液则说明采精时温度不当，这样的精液均应废弃不用。
(3)精液的气味 正常的精液带有微腥味。精液带有恶臭味是有炎症的表现，受包皮污染的精液气味也很大，带尿味、氨味以及其他气味的精液不能使用。
(4)精液pH 可用pH试纸进行测定。正常精液呈弱碱性或中性，pH在7～7.8之间。一般来说，精液pH值越低，精子密度越大精液pH值越高，精子密度越小。
(5)精子的活力检查 用恒温载物台将精液加热至35～37℃，在100～400倍显微镜下观察精子，直线前进运动的精子所占的百分率即表示精子的活力。一般用0.1～1.0这10个数表示，刚采集的精液和刚稀释的精液活力要求不得低于0.7，保存24小时以上的精液使用前检查活力不得低于0.6，否则不能使用。
(6)精子的密度 指每毫升精液中所含的精子数，是确定稀释倍数的重要指标。用血细胞计数板进行计数或用精液密度仪测定。血细胞计数板计数方法：①以微量加样品取有代表性原精液100μl，3%NaCl 900μl，混匀，使之稀释10倍②在血细胞计数室上放一盖玻片，取1滴上述精液放入计数板的槽中，靠虹吸将精液吸入计数室内③在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数，将该数乘以50万，即得原精液每毫升的精子数(即精液密度)。精液密度仪使用方法见其说明书。也可以直接在显微镜下观察，根据视野中精子之间距离大小、稠密程度进行估算，将精子密度粗略分为密、中、稀三个等级。
(7)精子的畸形率 畸形率指异常精子的百分率。一般要求畸形率不得超过18%。可用普通显微镜测定，但需用伊红或姬姆萨染色。检查方法是，精液涂片、染色后，在400～600倍显微镜下观察，计算畸形精子占所数精子总数的百分率。计数时通常检查三个视野，计算500个以上精子。猪精子畸形率超过20%不宜使用。要求每头公猪每2周检查一次精子畸形率。
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