KIA的实验原理是怎样的?

KIA的实验原理是怎样的?,第1张

克氏双糖铁琼脂(KIA)

的原理和使用方法:

KIA常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力,可以把肠杆菌科细菌和其他科细菌区别出来。

KIA成分中含有葡萄糖和乳糖,二者比例为

1:10,

指示剂为酚红,其在PH<6.8时变为黄色,而KIA的PH为7.4,产少量的酸就可导致颜色变化。

生化原理:

斜面部分暴露于空气中,为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境。因此配KIA时,最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度,两者均为3cm

,以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境。

用针穿刺时,取单个菌落,穿刺至底部3-5mm处,然后在斜面上往复划线。放35度培养18-24小时。

观察结果:有三种类型

A.非发酵型:无碳氢化合物发酵,所以无酸产生,斜面上琼脂的肽降解产物是碱性物质导致斜面变红。这种类型的细菌称为非发酵型。

B.非乳糖发酵型:如果接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌,培养基内仅有0.1%葡萄糖可以产酸。开始阶段,培养8-12h时,产生的酸足以引起斜面和底部颜色变成黄色。在接下来的时间里,葡萄糖被完全消耗,斜面部分的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸,产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸;到18-24h,整个斜面又转换成碱性PH,颜色有变成红色。深部(厌氧区域),氨基酸降解不足以中和形成的酸,培养基仍为黄色。

C.乳糖(蔗糖)发酵型

kia培养基a/ag是A表示酸性;-/+表示有或者没有。

KIA常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力,可以把肠杆菌科细菌和其他科细菌区别出来。KIA成分中含有葡萄糖和乳糖,二者比例为1:10,指示剂为酚红,其在PH<6.8时变为黄色,而KIA的PH为7.4,产少量的酸就可导致颜色变化。

培养基

由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。


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