抗酸染色的原理:分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
抗酸染色法acid-fast staining method :1882年由埃利希(F.Ehrlich)首创并经F.齐尔(Ziehl)改进而创造出的细菌染色法。其中最具代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森(Ziehl-Neelsen)染色法和齐尔-加贝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸复红染色后,用盐酸乙醇分色,再用美蓝进行对比染色,即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色。
抗酸染色一般步骤:
初染:用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。
脱色:3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。
复染:用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。
1、原理
结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。
2、抗酸染色需要的材料
(1)结核病人痰
(2)抗酸染色液
(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。
扩展资料:抗酸染色的注意事项
1、染色程度可通过改变染色时间或染色温度做适当调整。
2、每次试剂用完后,请迅速盖好,以免挥发。
3、石炭酸对皮肤、粘膜有强列刺激性和腐蚀性,使用时请穿实验服并戴一次性手套操作。
参考资料:百度百科-抗酸染色
分枝杆菌进行抗酸染色时特征:结核病的病原菌-结核分枝杆菌是德国的科学家科赫 (Koch) 氏在1882年首先从结核病人的痰中发现的,证实了结核病的病原菌是结核分枝杆菌。
牛放线菌脓液中的硫黄样颗粒染色结果:抗酸染色过程中,结核分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。所以在抗酸染色镜下,其结果呈现红色。
培养特性
专性需氧。最适温度为37℃,低于30℃不生长。结核分枝杆菌细胞壁的脂质含量较高,影响营养物质的吸收,故生长缓慢。结核菌在含氧40%~50%并有5%~10%CO2和温度为36℃±5℃,合适PH值为6.8~7.2的条件下生长旺盛。在一般培养基中每分裂1代需时18~24小时,营养丰富时只需5小时。
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