在卵胞浆内单精子注射(ICSI)的治疗周期中,仍有约1%~3%的患者存在受精失败,主要原因是卵母细胞激活失败。人工辅助卵母细胞激活可以提高ICSI的受精率,有望为ICSI周期中反复受精失败或受精率低的夫妇带来福音。
鸡蛋的灵魂拯救
新生命始于受精,受精始于卵子激活,卵子激活始于“精卵接触(唤醒之吻)”和“精卵融合(灵魂交汇)”。体外受精(IVF)技术大大缩短了精子与卵子之间的时间空距离,为它们提供了一个美好的相遇机会。一旦试管婴儿失败,就需要进行胞浆内精子显微注射(ICSI)来帮助精子/卵子直接融合身体和灵魂。
然而,仍有部分患者(1%~3%)在ICSI治疗周期中受精失败。以前我们只能隔着“岸”面对面,从来没有一起生活过。近年来逐渐发展起来的卵母细胞辅助激活(AOA)技术,在改善ICSI后受精失败患者的妊娠结局方面取得了显著的效果,已成为治疗不孕症的重要手段。
一、什么是卵母细胞激活
卵母细胞激活是成功受精的必要环节。成熟的人卵母细胞停滞在第二次减数分裂中期(Mⅱ期)。卵母细胞只有在精子或某些理化因素的刺激下才能恢复并完成减数分裂,这个过程称为卵母细胞激活。简单来说,卵子需要精子的激活或者一些理化因素来完成受精过程。
卵母细胞的激活伴随着一系列重要事件,包括Ca2+休克、皮质反应、第二极体的放电、雌雄原核的形成、母体RNA的募集、DNA合成的启动等。其中,第二极体的放电和雌雄原核的形成是激活成功的标志。
精子需要触发卵母细胞内Ca2+振荡来激活卵子。即使将ICSI注入卵母细胞,圆头畸形精子或受精率低的患者精子也很难触发卵母细胞内的Ca2+振荡,因此不能完成受精过程。
如何引起ICSI后精子卵子的“灵魂休克”?
二、卵母细胞怎么辅助激活?对于ICSI受精失败的患者,在下一个取卵周期,先在体外完成常规ICSI操作,30分钟后进行卵母细胞辅助激活。
常见的辅助激活方式有:
1)物理方法(如电激活等。);
2)化学方法(如Ca2+载体A23187、SrCl2、离子霉素、环己酰亚胺、乙醇、二甲氨基嘌呤活化等。).
1物理激活:电激活电激活是一种经典的物理激活方法。当直流电通过卵母细胞时,使卵母细胞膜破裂,在其上留下许多小孔,使细胞外的Ca2+在短时间内流入细胞内,使细胞内的Ca2+浓度升高。与化学激活相比,电激活没有潜在的细胞毒性和致畸作用,安全性更高。但在电激活过程中,卵母细胞内会产生超氧化物,对胚胎产生不利影响。
2化学激活卵母细胞暴露于化学试剂,增加了细胞内Ca2+水平。在众多激活剂中,临床常用的有A23187和离子霉素。氯化锶(SrCl2)对小鼠有效,但对这种化学活化剂在人类中的使用仍有争议。
据报道,物理激活的成功率低于化学激活。我们生殖中心采用了目前比较成熟的处理方法A23187,明显提高了受精率。
3Ca2+载体A23187Ca2+载体A23187是一种广泛用于递送的化学活化剂。能选择性结合Ca2+,将Ca2+通过细胞膜转运到细胞质中,增加细胞质中Ca2+的浓度,产生Ca2+振荡。
三、辅助激活技术安全吗?
关于任何人类辅助生殖技术,关于安全性的讨论从来没有停止过。现已证明,离子霉素等化学激活对小鼠胚胎植入前后的发育无明显影响,出生的小鼠健康,生育能力正常。与此同时,一些生殖中心开始研究卵子激活对新生婴儿的影响。调查结果显示,这些儿童在神经发育和行为方面与常规儿童没有显著差异。虽然现有证据表明AOA对胚胎发育和胎儿生理心理没有显著影响,但由于样本量有限,需要通过扩大样本量来进一步论证。
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