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中国基础教育网（www.cbe21.com）是由教育部基础教育课程教材发展中心与北京师范大学共同创建的，面向全国基础教育工作者、学生、家长的专业服务平台，是中国基础教育领域的综合性网站。中国基础教育网重点在基础教育改革发展、教育观念、素质教育方面的导向性，着重增强涵盖基础教育改革方方面面的导向性，坚持访问对象全面参与的网际开放性。现已完成语文、数学、物理、化学、英语、政治、生物、历史、地理、体育、艺术教育11个学科频道和“教育新闻”、“地区教育”、“教坛之声”、“教育用品”、“教育社区”、“博客”、“原创”等主要栏目，建立了课程标准库、课程资源库、软件素材库、教研论文库等资源数据库。
中国基础教育网在教育部基础教育司的指导下，目前已成为中国最大的、最权威的基础教育平台，并成功搭建了为中国基础教育服务的三个平台：
中国基础教育的管理平台中国基础教育网承担着教育部网上教育信息的上传下达和综合管理任务。中基网现有教育部信息发布平台，基础教育类网站网校登记、备案管理平台，全国60多万所小学的主页展示平台，实现了网上管理的部分功能。
中国基础教育的资源共享平台中国基础教育网充分利用北京师范大学百年积淀的资源优势以及全国各省市教委、电教馆的资源积累，为全国教师、学生提供丰富的教育教学资源。同时，中基网“教育社区”栏目还建立了“资料交流区”，全国各地的教师可以在“资料交流区”上传资料，实现了基础教育领域内的资源共建、资源共享。
中国基础教育的信息交流平台中国基础教育网不仅为教师、学生提供了丰富的教育教学资源，更提供了先进的交流平台，使教师、学生、家长相互进行全面的沟通和交流，充分体现网络的交互性。中国基础教育网的宗旨是体现对基础教育领域的导向性，整合基础教育资源，提供综合权威的信息内容，建立开放性的信息开发、更新机制，激浊扬清、弘扬主流，为中国基础教育实现信息化贡献力量。
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迄今为止研究的低温脂肪酶都是由低温微生物分泌产生的。这些微生物主要分布于南、北极以及大洋底部等温度较低的区域。(BC<D>根据生长温度的上限不同，将低温微生物分为适冷菌（ !"#$%&’(&’)!%）和嗜冷菌（ !"#$%&’!%*+,）。适冷菌是指在#E 能够生长，但最适生长温度在"#E F $#E之间，极限生长温度在4#E的一类微生物；嗜冷菌是指温度低于#E时能缓慢生长，最适生长温度低于19E，而高于"#E不能生长的一类微生物。低温微生物代表着已开始探索，但尚未完全认识的一个新的微生物领域。低温微生物在长期的环境适应过程中，产生了独特的细胞学特征和生理生化特性。这些特征主要包括以下方面。（1）低温微生物在更大程度上合成了含有更多不饱和脂肪酸或短链脂肪酸的中性脂质及磷脂，细胞膜的流动性增强，从而有利于细胞内外的物质交换〔1〕。（"）细胞质低温防护剂如多元醇和海藻糖等浓度的改变以及冷激蛋白和冷适应蛋白（GBH2>GG<I>D<J>D<BK =CBD@<K）的表达。冷激蛋白和冷适应蛋白是指微生物在受寒冷刺激后过表达的一类蛋白质，对低温条件下蛋白质合成的调节以及I,LM 的折叠起重要作用。（$）产生低温酶。具有低温条件下催化能力的酶是极地微生物适应低温环境的一个极为重要的特点，这些酶在低温时有着比中温酶更高的催化效率，保证了生命活动在低温下能够正常进行。#" 低温脂肪酶的酶学特征和结构特征低温脂肪酶具有下列4 个特征。（1）在较低的温度下可以得到较多的酶。研究发现，低温菌酶的产量常常在低于该菌最适生长温度时最高。/@@C等〔"〕从南极海水中分离到4 株产脂肪酶的适冷莫拉氏菌（-’&./,++. "!0 ），该菌最适生长温度为"9E，但其脂肪酶的最适分泌量需在更低温度（$E）。分别在$E、16E和"9E对-’&./,++. +M144 进行培养和测定脂肪酶活力，发现其代时（N@K@C>D<BK D<I@）和上清液酶活分别为4A 9、"A #、1A 6（O）和1 19#、$7#、79（PQ I0）〔$〕。结果表明，在低温条件下得到的酶量较高，酶的活力也较高，从而保证低温环境中对底物的高效利用。（"）低温脂肪酶的最适作用温度较低。MC=<NKR 等〔4〕对静止嗜冷杆菌（1"#$%&’2.$(,&*3)3’2*+*"）S1# 所产生的脂肪酶与中温的铜绿假单胞菌（1",45’3’6." .,&47*6’".）49，$66 进行比较研究时发现，低温脂肪酶的最适作用温度在$9E左右，#E时仍保留酶活的"#T 左右。而中温酶在高于3#E时，酶活力仍不断增强，但在"#E以下，酶活几乎为#。（$）低温脂肪酶的比活力高，热稳定性差。一般说来，酶的比活力是和热稳定性呈负相关。酶分子的热稳定性主要来源于分子的刚性，刚性的增强使得酶与底物的相互作用受到影响，从而导致酶活性的下降，相反，柔性的增加使得酶促反应的活化能减少，热稳定性降低，但酶的活力提高。与中温酶相比，低温酶的共同特征是：（1）与蛋白质折叠和稳定性相关的弱作用（如氢键和盐键）的减少；（2）以一个低疏水性的疏水区域形成蛋白质的核心；（ 3）剔除和替换蛋白质二级结构的环和转角处的脯氨酸；（4）通过增加带电荷的侧链以增加溶剂和亲水表面的作用；（ 5）在结构功能域附近出现甘氨酸簇；（6）更广范围内的钙离子配位作用。这些结构的改变都有利于酶分子柔性的增加〔7〕。（8）低温脂肪酶的活化能低。酶在低温下具有很高的催化效率与其具有更松散和更具柔性的蛋白质结构相关联。这种蛋白质结构允许利用少的能量投入就产生具有催化效能的构象变化，因此它们与底物结合的活化能低，特别是在低温和常温与大分子底物结合的活化能更低〔9〕。如:<=>?@ 等〔A〕对南极耐冷菌静止嗜冷杆菌的脂肪酶序列的分析表明，该酶中碱性氨基酸的摩尔比例（:>B :>C /@D）（ 接近于"E !F）较中温菌（"E 8）和嗜热菌（"E 8F）中的比值低得多；:>残基的存在可使酶分子更加稳固，而在低温脂肪酶中，:>等稳定结构的氨基酸残基数量的减少，有助于形成一更具柔性的三级结构。另外，GH@ 的增加可促进蛋白质结构的柔性，从而有助于酶在低温环境中催化作用时的构象改变。通过对几种低温脂肪酶氨基酸序列〔A I JJ〕的比较发现，尽管这些酶的氨基酸序列差异较大，但它们在脂肪酶活性部位的结构中都包含两个保守序列，即含有活性)5中心的GH@KLJ K)5KL! KGH@ 和位于脂肪酶MK末端的%=DKGH@ 肽段。如果以:H1 和GH? 分别取代保守的)5和%=D，脂肪酶的活性会丧失。通过L 射线衍射技术发现活性部位被包埋在由一个或两个!K螺旋构成的“ 盖子”结构之下。脂肪酶必先经过一个构象变化，将盖子移开，暴露活性中心，才能发挥催化作用。!" 低温脂肪酶基因的异源表达低温脂肪酶是一种胞外酶，酶的产生要经过异源表达，修饰折叠，最终分泌至细胞外。决定脂肪酶表达的因素是多方面的，如宿主、外源基因、外界环境以及它们之间的相互作用等。低温脂肪酶的异源表达大多选择大肠杆菌做为宿主。现已发现分子伴侣能识别并调节细胞内多肽的折叠。如果宿主体细胞分子伴侣与外源基因表达所需要的分子伴侣不匹配，外源基因便不能正确表达。革兰氏阳性菌所产脂肪酶首先以“ 前酶原”的形式表达，酶的前体区域（<5K5>=N?）为信号肽，运输酶原至细胞外，酶原在胞外经蛋白酶水解后断裂产生成熟酶〔J!〕。+ND5?1O〔J#〕将革兰氏阴性菌脂肪酶的分泌机制概括为三种类型。（J）含有:*P 结合盒（:Q$）的输出体（:*PK2=?4=?>31DD5RR5 5S<NR5）。这种类型适用于M 端缺少代表性的信号序列，但$ 端包含靶信号序列的脂肪酶的分泌。:Q$ 输出体包括三种蛋白质，由内而外依次是:*P 酶，弓型的细胞膜融合蛋白（’.P）和外膜蛋白（-’P）。三种蛋白质组合体横跨内外细胞膜，从而在周质中形成通道直接将酶分泌到胞外。（!）分泌子（ D535RN?）介导的分泌。这种类型主要由!"# 基因编码的蛋白质组成，其分布于细胞内外膜，并在外膜形成孔状通道。（#）自输送体（1ORNR1?D<NR5）介导的分泌。通过该途径分泌的脂肪酶尽管分泌到胞外，但仍然与细胞表面密切相连或紧紧固着在细胞表面。脂肪酶包含两个独特的结构域，M 端具有催化活性并且暴露在细胞外，$ 端结构与所谓的自动输送蛋白（ 1ORNR1?D<NR5<NR5=?）类似，通过形成"K折叠结构的分泌通道协助将脂肪酶M 端转运出外膜。TO@5?〔J8〕在对脂肪酶异源表达的研究时发现，在分子伴侣的作用下，大肠杆菌中表达的$% "’"(’的脂肪酶可以分泌。但也有学者研究发现，能表达脂肪酶并不意味着能完全分泌至胞外。有一部分菌表达的重组蛋白存在于周质中，只有少部分分泌至胞外。.5HH5研究发现，莫拉氏菌*:J88 的脂肪酶在大肠杆菌中表达后，培养物的上清液几乎没有酶活性，而菌悬液有一定的酶活力，说明脂肪酶没有分泌到胞外，而是存在与外周质空间或镶嵌于细胞膜上。迄今为止，已经有多例低温脂肪酶能用基因工程技术成功表达的报告。$UNN 等〔F〕将分离自阿拉斯加土壤的适冷的假单胞杆菌的低温脂肪酶基因在大肠杆菌中表达。其最适<% 为FE " 左右，在87V时酶活力最高。以对硝基苯月桂酸酯为底物计算酶的活化能为AE AW31H B XNH，低于其它南极适冷菌的J!I JA W31H B XNH，和中温铜绿假单胞菌的!7 W31H BXNH。.5HH5〔Y〕报道了一株南极适冷型莫拉氏菌的脂肪酶基因在中温型大肠杆菌中的克隆与表达。结果发现，包含有耐冷型脂肪酶编码基因的克隆只有在生长温度从对应嗜温菌的最适生长温度#AV降至!7V或JAV以后，才表达有酯解活力脂肪酶，从而防止基因产物的热变性，重组酶的最适温度比野生型低了J"V，而且异源表达的脂肪酶比野生型具更明显的热不稳定性。+1DU=4〔J7〕将深海分离出的假欢迎分享，转载请注明来源：优选云
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