(1)收卵前的准备一是准备好收卵箱,长、宽各约45cm,高约8cm,四周底部有滤水孔。收卵前,应在箱底铺2cm厚的细沙。二是准备1根长约20cm、宽1、5cm、厚约0。3cm的竹片,作挖洞拨土工具;同时还要准备一个长镊子,作取卵工具。
(2)寻找产卵穴在整个产卵季节,每日早上太阳未出、露水未干时巡池1次,仔细检查产卵场是否有产卵痕迹。若发现卵穴,不要急于翻动或取卵,至少需经7~8h后,其胚胎已固定、动物极一端出现圆形小白点时方可采卵。实践中一般第一天早上发现卵穴后先做好标记,第二天早上采卵。
(3)收卵收卵时根据标记依次将洞口泥沙拨开,用镊子轻轻将穴内卵粒全部取出。取卵时应注意其受精发育情况,如果卵壳顶上有一白点,边缘清晰圆滑,卵粒颜色鲜亮呈粉红色或乳白色,卵个大而圆,即为受精发育良好的卵。否则,即为未受精或受精发育不良的卵。这些未受精卵、受精不良卵、畸形卵、壳上有黑斑的卵及破壳卵都应当剔除。装箱时应将动物极朝上,整齐地排列在收卵箱中,移入孵化箱或温室孵化。收卵完毕后,将产卵场整平,天旱时还要适当喷水,以便龟再次产卵。
我们经常可以看到一些广告上写着可以人工取卵,帮助怀孕,但是人工取卵究竟是什么呢?其实,人工取卵是一种帮助不能自己怀孕的夫妻受孕的方式,它的方式很复杂,一定要有专业的工具和技术。
人工取卵的方法取卵是在注射了人绒毛促性腺激素的35-36小时内进行。过早或过迟取卵都会影响卵的取出率和取出卵的质量。过早可能会使卵子未能完全成熟,有较多的未成熟卵,而过迟有可能使一些大卵泡排卵,因而取不到卵。
取卵是一个小手术,可以是在全身麻醉下或是在局部麻巢下进行。经阴道超声仪引导,将取卵针穿过阴道,直达卵巢吸取卵子后,实验室人员立即在显微镜下将吸到的卵子移到含有胚胎培养液的培养皿中,置于37℃的培养箱中培养。由于阴道内超声波吸入术是一种小手术,有些医生为了让患者节约费用只使用止痛药而不使用全身麻醉。
一般取卵时间在30分钟之内。患者取卵后只有轻微的疼痛和极少量的出血,休息1-2个小时就可以回家,不会影响日常工作和生活。由于卵泡大小不一,因此取出的卵子的成熟阶段并不完全一致。有的可能是未成熟的,而有的可能是过成熟的。刚取出的卵周围被卵丘细胞所包围,一般可以通过这些细胞的扩张程度判断出卵子的成熟情况。但是,要知道它们的准确成熟阶段,必须将这些细胞与卵子分开。一般说来,可发现有以下几种卵子:
成熟卵透明带下的卵周隙内有一个小的细胞,叫做第一极体,它是由卵子释放的。第一极体的释放是卵子成熟的指标。
未成熟卵有两种不同时期的未成熟卵。一种是在透明带下的卵周隙内没有第一极体,但卵子内有一个明显的核,叫做生发泡,这种卵叫做生发泡期卵,这是最早期的未成熟卵。另一种是卵子的卵周隙内没有第一极体,卵子内也没有一个明显的核,这是处于生发泡期卵和成熟卵之间的未成熟卵。未成熟卵是不能用于受精的,必须等到它们完全成熟后才能用来受精。
过成熟卵卵子成熟后必须受精。从卵子成熟到受精之间的时间一般是5-6个小时。如果在这个时间段内未能受精,卵子将会开始老化,最后死亡。由于卵子取出的时候卵泡大小不一,卵子的成熟阶段也就不可能在同一个时期。如果用时间过长,或卵子在受精前的体外时间过长都会使卵子过成熟。虽然过成熟卵能够被受精,但是由它产生的胚胎质量将会很差,胚胎移植后很难怀孕。
异常卵有些卵从体积上看要比正常卵大许多,卵周隙内有两个第一极体,这样的卵的染色体是异常的,通常有两套染色体,因此是不能用来受精的。有的卵可能在成熟的某一阶段细胞内有异常的形态,如空泡、质地变黑等,这些都是卵子质量不好的标志。
人工取卵疼吗取卵是在半麻的状态下进行的,整个取卵时间通常是8-16分钟左右,整个过程,供卵志愿者根据每个人体制不同,不会有很大的痛苦,取完后会感觉腹部有点胀。
在超声引导下经阴道取卵自从1978年,通过腹腔镜取卵以来,取卵技术已有了很大进步,从腹部超声引导下经皮肤膀胱和经尿道膀胱,到现代经阴道超声取卵。这种相对简便和安全的方法提高了取卵的效率,能在局麻下进行,并且可以和各种不同的辅助生殖技术(ART)相结合。
超声技术的不断改进,使这些进步成为可能。现在已有了小型阴道超声探头,比如频率为5MHz或7.5MHz阴道探头,分辨率高,使用起来病人相对舒适。分辨率高,有助于精确辨别和定位卵泡。通过简单地旋转探头,在二维图像中确定卵泡的形状,使低回声卵泡从同样低回声的盆腔血管中区分出来,这样每一个卵泡都可以被准确地吸入,大大提高了取卵率,也能减少女性的不适感。
人工取卵的过程 试管婴儿登记体检我们国家的生殖中心只允许为做试管婴儿的妇女冷冻卵子,如果有多余的卵子,且夫妻双方都同意,也可以进行捐赠。冷冻卵子之前需要进行相关的身体检查。
打排卵针取卵如果要想取卵,首先要在促性腺激素促卵发育后,给女性打促卵泡成熟的针。大约36小时后,医生会在B超引导下,经过阴道穿到卵巢内,把卵泡的卵泡液吸出来。通过B超可以看到,一团透明的像水晶球一样的物质就是卵泡,卵泡中孕育着成熟的卵子。取卵手术通常不超过10分钟。
卵泡液送至实验室医生把卵泡液吸出来至试管中,迅速通过窗口传递到实验室中的显微镜下。冻卵的过程全部在实验室里进行操作。卵子很娇气,怕光、怕冷、怕热,所以整个取卵过程必须在暗环境下迅速完成。
提取出卵母细胞卵子细胞悬浮在卵泡液中,实验室的技术人员首先会在显微镜下把卵泡液中的卵子细胞分离出来。
卵子脱水实验室的工作人员把卵子放进高度浓缩的脱水冷冻保护溶液中进行脱水。
迅速放入有液氮的专用容器中脱水后的卵子立即投入液氮中,此种方式称之为玻璃化冷冻。
放入液氮罐中卵子被转移至零下198℃的液氮罐中长期保存,每一份卵子都有相应的编号,便于日后使用
使用时进行复温若干时间后,当妇女需要使用卵子时,专业技术人员从液化氮中取出卵子,复温,用溶液清除掉卵子所用的化学物质。把存活的卵子和男方的精子进行体外受精,培育成胚胎。大约3-5天后,选择最健康的胚胎移植到妇女子宫。
无痛取卵属于超声引导下的有创介入操作,需要用穿刺针经阴道穿刺,不麻醉肯定是不行的。全麻是可以的,一般是静脉麻醉,手术中是睡着的(实际上处于麻醉状态)不会疼。缺点是静脉麻醉因为不需要气管插管,所以风险要大一些,存在出现呼吸抑制、心脑血管意外等麻醉意外的风险。局麻也可以操作,缺点是麻醉效果不确切,手术中可能会疼,而且容易造成情绪紧张、焦虑等等。就我个人的经验来说,实际上很多选择局麻的病人,手术中疼痛的程度也完全可以控制在可以接受的范围内,而静脉全麻也不一定效果很好,术后恶心呕吐、头晕乏力等等也很常见。个人建议如果不是特别胆小怕疼的,不需要选择全麻,没有必要。
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