盐酸普鲁卡因鉴别反应为什么磺化反应和碘化反应不行

盐酸普鲁卡因：

1. 具有芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别2本品显氯化物的鉴别反应3水解反应 检查：对氨基苯甲酸，TLC法 原理： 方法：

指示终点的方法：永停滴定法、电位法、内指示剂法或外指示剂法。

滴定时：将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液迅速滴定，随滴随搅拌，至终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定。 盐酸：加快重氮化反应速度，重氮盐在酸性溶液中稳定。防止生成偶氮氨基化合物。 溴化钾：催化剂，加快反应速度。 维生素a

三氯化锑反应：无水无醇条件下，在三氯化锑氯仿溶液中立刻呈蓝色后变红 紫外分光光度法348、367、389波长处有吸收峰322处有拐点 Tlc：显色剂：磷钼酸 维生素b1

鉴别：1.硫色素反应：碱性溶液中被铁氰化钾氧化成硫色素，在正丁醇中显蓝色荧光 2.沉淀反应：与生物碱试剂反应 3.氯化物反应

硝酸铅反应：与碱供热产生na2s，与硝酸铅生成pbs

原料药采用非水溶液滴定法，其原理是维生素b1分子中含有两个碱性的已成盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中（醋酸汞存在下）均可与高氯酸作用，根据消耗高氯酸的量即可计算维生素b1的含量。主要条件：精密称取本品一定量，加冰醋酸与醋酸汞试液、喹哪啶红-亚甲基蓝混合指示液，用高氯酸滴定液（0.1mol/l）滴定，空白实验校正。每1ml高氯酸滴定液相当于16.86mg维生素b1 维生素b1 维生素c

鉴别1.Agno3反应：产生Ag

2.2，6一二氯靛酚反应（酸玫瑰红，碱性蓝色，反应后变无色） 3.红外光谱法

维生素c分子中的二基具有较强的还原性，在酸性条件下可被碘液氧化为二酮基，以淀粉为指示剂，可用碘液直接滴定

注意 ：1.滴定反应在酸性溶液（醋酸）中进行，可使维生素C受空气中氧的化速度减慢；2加新沸过放冷蒸馏水溶解，是为了减少水中溶解氧的影响；3供试品溶于稀酸后仍需立即滴定，以减少空气中氧的干扰。

碘量法用于测定维生素C注射剂含量时，由于处方中加有稳定剂焦亚硫酸钠，而焦亚硫酸钠易水解生成亚硫酸钠，有还原性，对本法有干扰。所以在滴定前需加入丙酮（或甲醛）作掩蔽剂，与稳定剂生成无还原性的加成产物，以消除其干扰。 盐酸异丙嗪 紫外区分别在205nm、254nm、300nm 分子结构中含有氮原子而呈弱碱性，酸碱电位滴定法测定原料药的含量。盐酸异丙嗪片剂和注射剂因赋形剂和抗氧剂等的影响（中国药典）两者均采用高效液相色谱法测定含量 杂质检查：澄清度与颜色（控制吸光度法）草酸（比浊法） 铁铜的检查（原子吸收分光光度法）

巴比妥（丙二酰脲结构）

弱酸性：母核环状结构中含1，3-二酰亚胺，因而其分子结构能发生酮式-烯醇式互变结构，在水溶液中能发生二级电离二线弱酸性

水解反应：巴比妥类药物的分子结构中含有酰亚胺结构，与碱液共沸，释放出氨气，可使红色石蕊试纸变蓝 与重金属离子反应： 巴比妥鉴别反应：

1银盐反应取供试品约0.1g，叫碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2min，滤液中逐滴加入硝酸银溶液即产生白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银溶液，沉淀不溶解。 2铜盐反应： 铜吡啶试液（巴比妥类：紫色沉淀，硫代巴比妥类：绿色） 3苯取代基基反应：苯巴比妥：（硝酸钾加硫酸：黄色硝基化合物，甲醛+硫酸：玫瑰红色产物）

4不饱和取代反应：与碘、溴、高锰酸钾反应褪色

5硫元素反应：与铅离子生成白色沉淀，加热后变成pbs

苯巴比妥杂质：苯基丙二酰脲（酸度检查）苯巴比妥（乙醇溶液澄清度检查） 有关物质（HPLC） 中碱性物质（乙醚溶解，提取称量） 阿司匹林

理化性质1酸性：有羧基2光谱：有特定光谱3三氯化铁反应 鉴别：三氯化铁反应

杂质检查：Na2co3不溶物（澄清度检查）易碳物质（比色法）有关物质（HPLC） 吡啶类：异烟肼鉴别：吡啶开环反应（戊烯二醛反应） 喹啉类：绿奎宁反应：奎宁盐在微酸性水溶液中滴过过量的溴水或氯水，再滴加过量的氨水，即显绿色。

地西泮1水解后重氮化-偶合反应：盐酸溶液加热煮沸，放冷，加硝酸钠和碱性B-萘酚试液，生成橙红色沉淀

2沉淀反应：有弱碱性，可与金属盐或大分子酸形成沉淀 3氯元素反应 4紫外光度法和红外光度法 杂质：有关物质：hplc

激素类:1 C17-a-醇酮基反应：能与碱性酒石酸铜试液、氨制硝酸盐试液以及四氮唑试液反应呈红色，氨 制硝酸银试液反应（黑Ag）

2酮基呈色反应：和某系羰基试剂如异烟肼反应形成黄色的腙而用于鉴别 3甲酮基呈色：与亚硝基铁氰化钠反应，黄体酮呈蓝紫色

4酚羟基反应：雌激素c3有酚羟基，与重氮苯磺酸反应生成红色偶氮染料 5炔基的沉淀反应：遇硝酸银试液生成白色的炔银沉淀

古蔡氏法：金属锌和酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成砷化氢气体，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准溶液生成的砷斑比较，判断是否符合规定主要试剂：碘化钾，酸性氯化亚锡

碘化钾作用：1.将AS5+还原成3+。2.与反应产生的锌离子形成稳定的化合物，利于生成砷化氢的反应不断进行；3可抑制锑化氢的形成

酸化氯化亚锡的作用：还原剂，与KI共同将AS5+还原成3+；2.将生成的I2还原成I-；3与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，去去极化作用，从而使氢气均匀地发生4抑制锑化氢的形成 醋酸铅棉花的作用：吸收硫化氢（少量硫化氢在酸性溶液中产生避免硫化氢与溴化汞作用生成硫化汞色斑干扰。

提取方法：冷浸法、回流提取法、连续回流提取法、水蒸气蒸馏法、超声波提取法、超临界流体萃取法

药品非临床研究质量管理规范GLP药材种植质量管理规范GAP 药品生产质量管理规范GMP药品临场研究质量管理规范GCP 药品经营质量管理规范GSP

特殊杂质检查方法

物理法 1（颜色差异：对氨基水杨酸钠溶液颜色差异）（臭味及挥发性差异：麻醉乙醚中异臭检

查）（溶解度差异：阿司匹林澄清度检查） 化学法 （酸碱反应：枸缘酸钾酸碱度检查）（呈色反应：贝诺酯中的对氨基酚）（沉淀反应：硫

脲）（产生气体：氨，铵盐）

光学分析法 （旋光法：VB2，硫酸阿托品）（紫外—可见分光光度法：盐酸丙米嗪，肾上腺素，

碘解磷定）（红外分光光度法：甲苯咪唑） 色谱分析法 （TLC游离肼）（HPLC水杨酸）

1.抗生素的含量或效价测定方法可分为生物学方法和理化方法 抗生素检定法的测定方法包括管碟法和浊度法

流动相的分析系统（FIA）包括：采样单元，传感单元和数据处理单元 十一、1高效凝胶色谱法:庆大霉素杂志检查

2.生物制品分析 检测的特殊性:生活活性检查，安全性检查，效价测定

3.检测内容:鉴别实验，理化鉴定内容，安全检查对象，安全检查内容，生物制品的效力

测定

安全检查内容包括:过敏性物质的检查，杀菌,灭活和脱毒检查，残余毒力和毒性物质的

检查，外源性污染的检查

4.生化药物特点:分子量不确定，容易失活，易引入热原等杂质，效价测定，结构确证困难 5.鉴别与定量方法:理化鉴别法 例子：胰蛋白酶(呈色法) 鱼肝油(HPLC) 胃蛋白

酶(沉淀法) 组氨酸(TLC) 细胞色素(紫外) 尿激酶(酶法) 肝素(电泳法)

6.安全性检查:热原检查法和细菌内毒素检查法(兔) 异常毒性试验(小鼠) 过敏试验(豚鼠)

降压物质试验(猫) 无菌试验(薄膜过滤法) 十二、1.饮用水水样的检验指标:挥发酚类检验，硼的检验，铅的检验，农药指标对硫磷的检验，

总大肠菌群的检验

2.制药用油有：大豆油，氢化大豆油，氢化蓖麻油，橄榄油，精制玉米油 3.评价制药用油质量的重要指标：相对密度，折射率，皂化值，酸值

4.硬脂酸镁要检查重金属，铁盐，硫酸盐和氯化物等一般杂质及微生物限度，相对含量的检查采用气相色谱法（GC）

二、QM质量管理 QI质量改进 .QC质量控制:对原材料,中间体,产品的系统质量制

三、1.中国药典由凡例,正文,附录,索引组成2.中国药典ChP，美国药典USP，英国药典BP，日本药局方JP

四、1.样品采集原则:均匀,合理,真实性,科学性,代表性；

样品前处理不经有机破坏的分析法:直接测定法,经水解后测定法,经氧化还原后测定法,溶剂萃取法

4.经有机破坏分析法:湿法有机破坏法(凯氏定氮法),干法有机破坏法(氧瓶燃烧法)

含F HF 茜素氟蓝比色法 水 含P P2O5 钼蓝(磷钼蓝)比色法 水

含Se SeO2,SeO3 二氨基萘比色法 硝酸溶液 五、1.鉴别实验条件:溶液的酸碱度,溶液的浓度,反应的温度,反应介质

2.鉴别实验方法:物理:熔点,比旋度,吸收系数(摩尔吸收系数R,百分吸收系数E1m),折射率

光谱:紫外-可见光谱鉴别法,红外光谱鉴别法

色谱:薄层色谱法(TLC),高效液相色谱法(HPLC),气相色谱法(GC) HPLC系统适应性指标:重复性,拖尾因子,分离度(R),理论塔板数(n)

药物重金属检查法中，重金属以什么代表？有哪几种显色剂？检查的方法共有哪几种？

答：(1)在药品生产中遇到铅的机会较多，铅在体内易积蓄中毒，检查时以铅为代表。 (2)有H2S、硫代乙酰胺、硫化钠

(3)中国药典(2005版)重金属检查法一共载有四法。

第一法 硫代乙酰胺法

第二法 将样品炽灼破坏后检查的方法。

第三法 难溶于酸而能溶于碱性水溶液的药物，用Na2S作为显色剂

第四法 微孔滤膜法

药物的杂质检查的内容(包括杂质的来源，杂质的限量检查，什么是一般杂质和特殊杂质。

答：(1)杂质的来源：一是生产过程中引入。二是在储存过程中产生。

(2)杂质的限量检查：药物中所含杂质的最大允许量叫做杂质限量。通常用百分之

几或百万分之几表示。

(3)一般杂质及特殊杂质一般杂质：多数药物在生产和储存过程中易引入的杂质如：

氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、有色金属等。

特殊杂质：是指在该药物的生产和储存过程中可能引入的特殊杂质。如阿司匹林中

的游离水杨酸、肾上腺素中的酮体等。 硫代乙酰胺法检查重金属的原理和方法

答：(1)原理 硫代乙酰胺在弱酸性条件下(pH3.5醋酸盐缓冲液)水解，产生硫化氢，与微量重金属生成黄色到棕色的硫化物混悬液。 CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 + H2S

(2)方法 取各药品项下规定量的供试品，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使

成25ml，加硫代乙酰胺试液2ml，放置，与标准铅溶液一定量同法制成的对照液比较，判断供试品中重金属是否超过限量。

请说明阿司匹林片剂采用两步滴定法的原因及解释何为两步滴定法？

答： (1)因为片剂中除加入少量酒石酸或枸橼酸稳定剂外，制剂工艺过程中又可能有水解产物(水杨酸、醋酸)产生，因此不能采用直接滴定法，而采用先中和共存酸，再在碱性条件下水解后测定。

(2)中和：取片粉、加入中性醇溶液后，以酚酞为指示剂，滴加氢氧化钠滴定液，

至溶液显紫色，此时中和了存在的游离酸，阿司匹林成了钠盐。

水解与测定：在中和后的供试品溶液中，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，置

水浴上加热使酯结构水解、放冷，再用硫酸盐滴定液滴定剩余的碱。

在亚硝酸钠滴定法中，一般向供试品溶液中加入适量溴化钾。加入KBr的目的是什么？

答：使重氮化反应速度加快。

因为溴化钾与HCl作用产生溴化氢。溴化氢与亚硝酸作用生成NOBr。

若供试液中仅有HCl，则生成NOCl由于生成NOBr的平衡常数比生成NOCl的平衡常数大300位。所以加速了重氮化反应的进行。

目录1 拼音2 英文参考3 国家基本药物4 维生素C概述5 维生素C主要生理功能6 维生素C医学检查 6.1 检查名称6.2 分类6.3 维生素C的测定原理6.4 试剂6.5 操作方法6.6 正常值6.7 化验结果临床意义6.8 附注6.9 相关疾病 7 维生素C的药理作用8 副作用9 禁忌10 相关药品11 维生素C药典标准 11.1 品名 11.1.1 中文名11.1.2 汉语拼音11.1.3 英文名 11.2 结构式11.3 分子式与分子量11.4 来源（名称）、含量（效价）11.5 性状 11.5.1 熔点11.5.2 比旋度 11.6 鉴别11.7 检查 11.7.1 溶液的澄清度与颜色11.7.2 草酸11.7.3 炽灼残渣11.7.4 铁11.7.5 铜11.7.6 重金属11.7.7 细菌内毒素 11.8 含量测定11.9 类别11.10 贮藏11.11 制剂11.12 版本 12 维生素C说明书 12.1 药品名称12.2 英文名称12.3 维生素C的别名12.4 分类12.5 剂型12.6 维生素C的药理作用12.7 维生素C的药代动力学12.8 维生素C的适应证12.9 维生素C的禁忌证12.10 注意事项12.11 维生素C的不良反应12.12 维生素C的用法用量12.13 维生素C与其它药物的相互作用12.14 专家点评 附：* 维生素C相关药品说明书其它版本 1 拼音

wéi shēng sù C

2 英文参考

vitamin C [湘雅医学专业词典]

antiscorbic acid [朗道汉英字典]

3 国家基本药物

与维生素C有关的国家基本药物零售指导价格信息

序号 基本药物

目录序号 药品名称 剂型 规格 单位 零售指

导价格 类别 备注 1026 166 维生素C 注射剂 500mg:2ml 瓶（支） 0.34 化学药品和生物制品部分 * 1027 166 维生素C 注射剂 1g:5ml 瓶（支） 0.58 化学药品和生物制品部分 1028 166 维生素C 注射剂 1g,冻干粉（溶媒结晶粉） 瓶（支） 3.6 化学药品和生物制品部分

注：

1、表中备注栏标注“*”的为代表品。

2、表中代表剂型规格在备注栏中加注“△”的，该代表剂型规格及与其有明确差比价关系的相关规格的价格为临时价格。

4 维生素C概述

维生素C又叫抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，它与人体的多种代谢有关。人体不能合成及贮存，必需从外界摄取。它在新鲜绿叶蔬菜、橘子、柚及柠檬等中含量丰富。维生素C在体内的保存率与摄入量有关，剂量愈小，在体内保存率愈高，可以完全不从尿中排出。在正常剂量情况下，维生素C体内库存是1500mg。维生素C摄入不足、吸收障碍或需要量增多可以致病。婴儿常因乳母维生素C缺乏，使乳汁中维生素C含量不足而得病。

5 维生素C主要生理功能

1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合；

2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。

3、改善铁、钙和叶酸的利用。

4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。

5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血。

6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。

6 维生素C医学检查6.1 检查名称

维生素C

6.2 分类

血液生化检查 >血清维生素测定

6.3 维生素C的测定原理

（1）血清、血浆维生素维生素C含量测定：目前常用的方法是2，4二硝基苯肼比色法。总抗坏血酸包括还原型、脱氧型和二酮古乐糖酸。血清法是将样品中的还原型抗坏血酸用硫酸铜溶液氧化成脱氧型抗坏血酸，然后与2，4二硝基苯肼作用，生成红色的脎，脎的含量与总抗坏血酸量成正比；血浆法是将血浆中抗坏血酸氧化成二酮古乐糖酸，后者与2，4二硝基苯肼偶联生成脎，脎的生成量与抗坏血酸量成正比；另外，2，6二氯酚靛酶在堿性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色，由于抗坏血酸具有很强的还原性，可将2，6二氯酚靛酶还原成无色。用2，6二氯酚靛酶滴定酸性溶液中的抗坏血酸时，若有红色出现即表明抗坏血酸已被用尽，根据所消耗的2，6二氯酚靛酶的量即可以计算出血浆中抗坏血酸的含量。

（2）血白细胞血小板层维生素C含量测定：通过草酸处理的血液经过离心沉淀后出现白细胞血小板层，白细胞中的抗坏血酸可被三氯醋酸提取，然后用测定血浆中抗坏血酸的方法，测定其抗坏血酸的含量。

（3）尿维生素C含量测定：用活性炭将尿液中的还原型抗坏血酸氧化成脱氧型抗坏血酸，与2，4二硝基苯肼作用，生成红色的脎，脎的含量与总抗坏血酸量成正比；也可以采用2，6二氯酚靛酶还原法。

6.4 试剂

（1）0.75mol/L偏磷酸 称偏磷酸30g，加水至500ml溶解，可保存1w。

（2）4.5mol/L硫酸 量取浓硫酸250ml，小心缓慢地倒入冷水500ml中，待溶液冷至室温，加水至1L，混匀。

（3）20g/L 2，4二硝基苯肼 称2，4二硝基苯肼10g，用4.5mol/L硫酸溶液溶解并稀释至500ml。此液在冰箱中至少可保存1w。

（4）50g/L硫脲 称硫脲5g用水溶解并释释至100ml，在4℃中可保存1个月左右。

（5）6g/L硫酸铜溶液 称无水硫酸铜0.6g，用水溶解并稀释至100ml，室温下可稳定1年。

（6）抗坏血酸储存标准准液（2.8mmol/L） 称抗坏血酸50mg，用偏磷酸溶解并精确稀释至100ml混匀。

（7）抗坏血酸应用标准液 用0.75mol/L偏磷酸分别稀释成14、28、110μmol/L（2.5、5.0、20mg/L）。需当天配制。

（8）12mol/L硫酸 于1L烧瓶加入冰冷水300ml，将浓硫酸650ml缓慢倒入，冷却后再用水稀释至1L。

（9）二硝基苯肼、硫脲、硫酸铜混合液（DTC） 取硫酸铜溶液5ml加入到硫脲5ml及2，4二硝基苯肼100ml中。用前现配。

6.5 操作方法

（1）吸取偏磷酸溶液2.5ml加血清0.5ml，充分混匀，离心约10min。吸取上清液1.2ml，加于13×100mm螺口塞试管中，每标本做两平行管。

（2）取每种浓度的应用标准液1.2ml，加于其他各个13×100mm螺口塞试管中，每种标准做两平行管。

（3）取偏磷酸1.2ml，加于另外13×100mm螺口塞试管中作为空白，做两个平行管。

（4）在以上各管中，各加DTC试剂0.4ml，盖塞，混匀，在37℃水浴中保温3h。

（5）把各管放入冰浴中冷却10min，然后在每管中各缓慢加预冷的12mol/L硫酸2.0ml，小心混匀，立即放回冰浴中。

（6）用偏磷酸空白管在520nm处将分光光度计调至吸光度零点，然后读取标准及未知样品的吸光度。

6.6 正常值

血清（浆）维生素C含量测定：须禁食后抽血进行维生素C含量测定（表1）。

血白细胞血小板层维生素C含量测定：每百克白细胞中维生素C含量＜1.425mmol为不足；在1.425～1.710mmol之间为正常；1.710～1.995mmol之间为充裕；＞1.995mmol为饱和。

尿维生素C含量测定：24h尿中维生素C含量为20～40mg。另有负荷试验，口服维生素C 500mg后收集4h尿，测定尿中维生素C的排出量，维生素C＜5mg为不足；5～13mg为正常；＞13mg为充裕（2，4二硝基苯肼比色法）。或维生素C＜3mg为不足；3～10mg为正常；＞10mg为充裕（2，6二氯靛酶法）。

6.7 化验结果临床意义

（1）临床诊断：维生素C缺乏缺乏病（vitamin C deficiency）又称坏血病（scurvey）。维生素C缺乏的主要表现为出血、骨骼改变（如骨膜下出血、骨折、干骺脱位）齿龈炎及伤口愈合不良。

维生素C缺乏的诊断主要根据病史、典型的临床表现及X线摄片长骨的改变。必要时才做血浆维生素维生素C、白细胞血小板层或尿中维生素C值的测定。

（2）实验室诊断方法的评价：

①血浆维生素维生素C含量测定：它仅反映膳食中维生素C的摄入情况，不能反映体内维生素C的储存量，所以结果较低也不能证实坏血病的存在。无论何种膳食，妇女血浆中的维生素C含量比男性高出20%。

②血白细胞血小板层维生素C含量测定；其值能反映组织内维生素C储存情况，不受近期膳食中维生素C摄入量的影响。如果维生素C含量为零，表明有潜在的维生素C缺乏，它可以出现在维生素C缺乏缺乏病的临床症状出现之前。

③尿中维生素C含量的测定：受到血中浓度的影响。人类维生素C的排出途径为尿，只有当体库内维生素C的储存量达到饱和后才从尿中排出。当血浆维生素维生素C浓度下降时，肾小管可以从原尿中回吸收一部分。

6.8 附注

（1）在本法中，抗坏血酸还原为氧化型的脱氢抗坏血酸，因此在测定血清和尿中的维生素C总量均很满意。（血清中一般含有少量的脱氢抗坏血酸，而尿中却含有大量的脱氢抗坏血酸）。

（2）向测定体系中加入硫脲能减少非维生素C物质干扰，如果糖、葡萄糖醛酸。由于该类物质也与二硝基苯肼反应，因此在加入DTC试剂后需较长的保温时间以排除干扰。

（3）在准备试剂和测定过程中，要穿戴好防护镜和实验服，以防硫酸对人的损伤。在配制4.5mol/L硫酸时，可在冰浴中操作，以防止激烈放热反应。

（4）本法的线性范围可至110μmol/L。

6.9 相关疾病

维生素C缺乏病

7 维生素C的药理作用

维生素C在体内参与多种反应，如参与氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。从组织水平看，维生素C的主要作用是与细胞间质的合成有关。包括胶原，牙和骨的基质，以及毛细血管内皮细胞间的接合物。因此，当维生素C缺乏所引起的坏血病时，伴有胶原合成缺陷，表现为创伤通难以愈合，牙齿形成障碍和毛细血管破损引起大量瘀血点，瘀血点融合形成瘀斑。

8 副作用

过量服用使白细胞的抗病能力明显下降。也可能会引起草酸及尿酸结石的形成（摄取钙、维生素B6及每天喝充足的水可以予以调整）。摄取过量时，会引起一些不舒服的副作用，如腹泻、多尿、皮疹等。有以上症状时，必须减量。

9 禁忌

正在接受放射线或化学药物治疗的癌症患者不宜服用维生素C。

10 相关药品

维C橙皮苷、维生素C

11 维生素C药典标准11.1 品名11.1.1 中文名

维生素C

11.1.2 汉语拼音

Weishengsu C

11.1.3 英文名

Vitamin C

11.2 结构式

11.3 分子式与分子量

C6H8O6    176.13

11.4 来源（名称）、含量（效价）

本品为L抗坏血酸。含C6H8O6不得少于99.0%。

11.5 性状

本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸；久置色渐变微黄；水溶液显酸性反应。

本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。

11.5.1 熔点

本品的熔点（2010年版药典二部附录Ⅵ C）为190～192℃，熔融时同时分解。

11.5.2 比旋度

取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.10g的溶液，依法测定（2010年版药典二部附录Ⅵ E），比旋度为+20.5°至+21.5°。

11.6 鉴别

（1）取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成二等份，在一份中加硝酸银试液0.5ml，即生成银的黑色沉淀；在另一份中，加二氯靛酚钠试液1～2滴，试液的颜色即消失。

（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（《药品红外光谱集》450图）一致。

11.7 检查11.7.1 溶液的澄清度与颜色

取本品3.0g，加水15ml，振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ A），在420nm的波长处测定吸光度，不得过0.03。

11.7.2 草酸

取本品0.25g，加水4.5ml，振摇使维生素C溶解，加氢氧化钠试液0.5ml、稀醋酸1ml与氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；另精密称取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1ml与氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为对照溶液。供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0.3%）。

11.7.3 炽灼残渣

不得过0.1%（2010年版药典二部附录Ⅷ N）。

11.7.4 铁

取本品5.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ D），在248.3nm的波长处分别测定，应符合规定。

11.7.5 铜

取本品2.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铜溶液（精密称取硫酸铜393mg，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ D），在324.8nm的波长处分别测定，应符合规定。

11.7.6 重金属

取本品1.0g，加水溶解成25ml，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ H第一法），含重金属不得过百万分之十。

11.7.7 细菌内毒素

取本品，加碳酸钠（170℃加热4小时以上）适量，使混合，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅺ E），每1mg维生素C中含内毒素的量应小于0.020EU（供注射用）。

11.8 含量测定

取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30秒钟内不褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6。

11.9 类别

维生素类药。

11.10 贮藏

遮光，密封保存。

11.11 制剂

（1）维生素C片  （2）维生素C泡腾片  （3）维生素C泡腾颗粒  （4）维生素C注射液  （5）维生素C颗粒

11.12 版本

《中华人民共和国药典》2010年版

12 维生素C说明书12.1 药品名称

维生素C

12.2 英文名称

Vitamin C

12.3 维生素C的别名

高喜；丙素；丙种维生素；抗坏血酸；力度伸；浓维生素C；维生素丙；维他命C；玉莎维生素C；右旋抗坏血酸；Ascorbic Acid；Ascobicap；Cebione；Cetane

12.4 分类

循环系统药物 >调整血脂及抗动脉粥样硬化药物 >抗氧化剂

12.5 剂型

1.片剂：每片25mg，50mg，100mg；

2.注射剂：0.1g（2ml），0.25g（2ml），0.5g（5ml），2.5g（20ml）；

3.颗粒剂：2g（含维生素C 100mg）。

4.泡腾片剂：1g。

12.6 维生素C的药理作用

维生素C有调血脂和保护动脉内皮的作用，可降低血浆总胆固醇和升高高密度脂蛋白。抗组胺作用。维生素C是抗体及胶原形成，组织修补（包括某些氧化还原作用），苯丙氨酸、酪氨酸、叶酸的代谢，铁、糖类的利用，脂肪、蛋白质的合成，保持血管的完整等所必需的物质。维生素C和脱氢抗坏血酸在体内形成可逆的氧化还原系统，此系统在生物氧化及还原作用和细胞呼吸中起重要作用。维生素C可降低毛细血管通透性，加速血液凝固， *** 凝血功能，促进铁在肠内吸收，促使血脂下降，增加对感染的抵抗力，参与解毒功能，且有抗组胺及阻止致癌物质（亚硝胺）生成的作用。晶状体中含有丰富的维生素C，使谷胱甘肽维持还原型，在保持晶状体透明中起重要作用。

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12.7 维生素C的药代动力学

胃肠道吸收，主要在空肠。体内分布以腺体组织、白细胞、肝、眼球晶状体中含量较高。血浆蛋白结合率25%。肝内代谢。极少数以原形物或代谢物经肾排泄，主要代谢产物为草酸及其硫酸酯，当血浆浓度大于14μg/ml时，尿内排出量增多。可进入乳汁，可经血液透析清除。

12.8 维生素C的适应证

1.用于防治维生素C缺乏缺乏病（坏血病）、各种贫血、过敏性皮炎、瘙痒症、口疮、促进伤口愈合等。

2.用于防止冠状粥样硬化性心脏病（冠心病）、脑血管病等动脉粥样硬化性疾病。

3.各型白内障、出血性眼病（眼内出血）、角膜疾患、眼内炎症、视网膜、脉络膜病变等疾病的辅助治疗；

4.亦用于堿烧伤的对抗治疗。

5.急慢性传染病时，消耗量增加，应适当补充，以增强机体抵抗力。病后恢复期，创伤愈合不良者，也应适当补充维生素C。

6.克山病病人在发生心原性休克时，可用维生素C大剂量治疗。

7.用于肝硬变、急性肝炎和砷、汞、铅、苯等慢性中毒时的肝脏损害。

12.9 维生素C的禁忌证

对注射维生素C过敏者禁用。

12.10 注意事项

1.（1）半胱氨酸尿症；（2）痛风；（3）高草酸盐尿症；（4）草酸盐沉积症；（5）尿酸盐性肾结石；（6）糖尿病（可干扰血糖定量）；（7）葡萄糖6磷酸脱氢6磷酸脱氢酶缺乏6磷酸脱氢酶缺乏症（可引起溶血性贫血）；（8）血色病；（9）铁粒幼细胞性贫血或海洋性贫血（可致铁吸收增加）；（10）镰形红细胞贫血（可致溶血危象）。

2.药物对妊娠的影响：维生素C可通过胎盘，孕妇大量服用时，可产生婴儿坏血病。

3.药物对哺乳影响：维生素C可分泌入乳汁。

4.不宜与堿性药物（如氨茶堿、碳酸氢钠、谷氨酸钠等）、维生素B2、三氯叔丁醇、铜、铁离子（微量）的溶液配伍，以免影响疗效。

5.突然停药，有可能出现维生素C缺乏缺乏病症状，应逐渐减量停药。

6.有溃疡病者、痛风、糖尿病患者慎用。

12.11 维生素C的不良反应

快速静脉注射可引起头晕、晕厥；长期服用每天2～3g可引起停药后维生素C缺乏缺乏病；大量应用（每天用量1g以上）可引起腹泻、皮肤发红发亮、头痛、尿频（每天用量600mg以上时）、恶心、呕吐、胃痉挛；动脉粥样硬化患者应用大剂量维生素C，可使血清胆固醇升高。

12.12 维生素C的用法用量

1.（1）口服给药：①一般用量：每次50～100mg，每天2～3次；②慢性透析患者：每天100～200mg；③维生素C缺乏：每次100～200mg，每天1～3次，至少服2周；④酸化尿液：每天口服4～12g，分次服用，每4小时1次；⑤特发性高铁血红蛋白血症：每天300～600mg，分次服用。（2）肌内或静脉注射：①维生素C缺乏：每天100～500mg，至少2周；②克山病心源性休心源性休克：首剂5～10g，加入25%葡萄糖注射剂中缓慢静脉注射。

2.儿童：（1）口服给药：维生素C缺乏时，每天100～300mg，至少服2周；（2）肌内或静脉注射维生素C缺乏时，每天100～300mg，至少2周。泡腾片，成人每次1片，每天1次；儿童每天半片，溶入1杯水中饮用。

12.13 药物相互作用

1.维生素C溶液在0.1%～0.25%浓度时即可还原高锰酸钾而使之失效，故可作为解毒剂，用于高锰酸钾中毒时的洗胃，并可防止高锰酸钾引起的组织损伤。

2.维生素C可使高毒性6价铬盐还原为低毒性3价铬盐，故可用为解毒剂。维生素C软膏外用，可以防治铬疮。

3.铁剂可与维生素C络合形成易于吸收的2价铁盐，铁吸收率增加可达145.6%。

4.糖皮质激素与维生素C合用，可降低激素代谢，使激素作用增强。

5.重金属解毒剂（二巯丙醇等）与维生素C联用可增强解毒作用。

6.维生素C可增强抗精神病药物（如氟哌啶醇）的多巴胺受体作用。

7.有报道称维生素C可使低毒5价砷还原为剧毒3价砷，增强毒性，并增加砷致癌危险性。水产品河虾、对虾等，多含有对人体无毒性的5价砷，如同时服用大量维生素C（或酸性食物），可发生砷中毒。

8.四环素类抗生素、氯化铵、氨茶堿、磺胺类，巴比妥类及水杨酸类药物（如阿司匹林）可增加维生素C的排泄，长期用药时应适量补给维生素C。维生素C能加快阿司匹林的吸收，促使后者发挥作用，并预防阿司匹林引起的胃肠黏膜损伤。

9.与巴比妥或扑米酮等合用，可促使维生素C的排泄增加。

10.纤维素磷酸钠可促使维生素C代谢为草酸盐。

11.长期或大量应用维生素C时，能干扰双硫仑对乙醇的作用。

12.维生素K3、碘剂及含有铜、铁等的肝制剂有氧化性，与维生素C可产生氧化还原反应，合用则疗效减弱或消失。

13.口服大剂量维生素C可干扰抗凝药（肝素，香豆素类）的抗凝效果，缩短凝血酶原时原时间。

14.大剂量维生素C可促使磺胺药、钙剂在肾脏形成结晶，应避免同服。

15.红霉素在酸性环境中极不稳定，与大量维生素C同服时，其效力可下降26%～44%。维生素C也可抑制庆大霉霉素的抗菌活性。

16.维生素C与去铁铵合用可增加尿铁排出。

17.维生素C可降低龙胆泻肝丸疗效。

18.抗组胺药与维生素C有协同性抗组胺作用。

19.口服大剂量维生素C可干扰抗凝药（肝素，香豆素类）的抗凝效果，缩短凝血酶原时原时间。

20.维生素B12与维生素C混合放置后维生素B12被破坏，因而可破坏食物中维生素B12；大量服用维生素C，可降低维生素B12生物利用度。维生素C在胃肠道内可使食物中的维生素B12的含量减少。

21.钙剂可与大剂量维生素C在尿中形成草酸钙结晶。

22.阿司匹林可降低维生素C胃肠道吸收和生物利用度，但维生素C能加快阿司匹林吸收，促使阿司匹林发挥作用，并可预防阿司匹林致胃肠黏膜损伤。

23.维生素C可能提高雌激素的生物利用度。

24.维生素C不宜与堿性药物、维生素B2、三氯叔丁醇、铜、铁离子溶液配伍。

25.有华法林并用，可引起凝血酶原时原时间缩短。维生素C能影响氨芐西林的稳定性，故不宜配伍使用。

26.可破坏食物中的维生素B12，阻碍食物中的铜、锌离子的吸收，从而可能引起维生素B12，铜、锌缺乏症。

27.维生素C能拮抗氯丙嗪的某些中枢抑制作用，缩短巴比土酸盐类的催眠时间。

28.不能同维生素K3配伍，可发生氧化还原反应，两者疗效减弱或消失。

12.14 专家点评

维生素C不同的测定方法

目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.

为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以"维生素C或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％,其中光度法占65.69％,电化法占18.63％,色谱法占12.75％复杂被测样品文献占文献总量的45.06％,其中光度法占60.92％,色谱法占19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显.

一．荧光法

1．原理

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定

3. 注意事项

3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。

3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。

3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）

1、原理：

还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。

2、注意事项

⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水；

⑵ 滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；

⑶ 样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C；

⑷ 贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生；

⑸ 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；

⑹ 在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；

⑺ 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。

3优点：它具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。在酸性环境中，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP还原成无色的还原型2,6—DCIP，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色，但在酸性溶液中则呈粉红色。因此，当用2,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被还原成无色，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下微量过剩的2,6—DCIP 便立即使溶液显示淡粉红色或微红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化。依据滴定时2,6—DCIP 标准溶液的消耗量 (ml)，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量。氧化型2,6—DCIP与还原型抗坏血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后，再用2,6—DCIP标准溶液滴定至终点。

食物和生物材料中常含有其他还原物质，其中有些还原物质可使2,6—DCIP还原脱色。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰，可用抗坏血酸氧化酶处理，破坏样品中还原型抗坏血酸后，再用2,6—DCIP 滴定样品中其他还原物质。然后从滴定未经酶处理样品时2,6—DCIP标准溶液的总消耗量中，减去滴定非抗坏血酸还原物质2,6—DCIP 标准溶液的消耗量，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2,6—DCIP标准溶液的体积，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量。另外，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2,6—DCIP反应速度的差别，并通过控制样品溶液在pH1 — 3 范围内，进行快速滴定，可以消除或减少其他还原物质的作用，一般在这样的条件下，干扰物质与2,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制。生物体液（如血液、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低，并且存在许多还原物质的干扰，同时还必须预先进行脱蛋白处理。在生物体液中含有巯其、亚硫酸盐及硫代硫酸盐等物质，它们都能与DCIP反应，但反应速度比抗坏血酸慢得多。样品中巯基物质对定量测定的干扰，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。

这是脎比色法，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一，是一种全量测定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V，然后与2，4—二硝基苯肼作用，生成红色的脎，将脎溶于硫酸后进行比色。最近国标中该法强调空白，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽、背景不一的误差。在实际杨梅汁Vc测定中，操作时间长，操作要求较严格，试剂较多，就一般实验室而言是目前可以采用的方法。

四 碘量法

1、维生素C的原理

维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。

2、注意事项

（1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度。

（2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点。

五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学方法）

1.应用于食品，饮料及生物制品检测

2.比色方法

此方法用于检测水果和蔬菜（如马铃薯），水果和蔬菜产品（如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁），婴儿食品，啤酒，饮料，流食，粉状和烘烤剂，肉产品，奶制品，葡萄酒，还有动物饲料，医药品（如维生素配制、阵痛药、退烧药）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)，

3.分析物

L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitamin C)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原因，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。它是一种相对敏感的物质，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。

L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分，如维生素产品和阵痛药，另外，它还用于动物饲料添加剂中。

4.原理

L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—>dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X

L-抗坏血酸 + ½ O2 AAO——>dehydroascorbate + H2OX

5.特异性

在给定的条件下，此方法特别针对于L-抗坏血酸。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。

6.灵敏度

测定灵敏度为0.005个吸光度单位，样品体积为1.600ml，此相当于0.1mg/l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。0.015个吸光度单位的差异能造成0.3 mg/l检测限，样品最大体积为1.600 ml.。

7.线性

测定的线性范围为0.5 ugL-抗坏血酸（0.3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1.600ml）到20 ugL-抗坏血酸（0.2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0.100ml）

8.精密度

在用一个样品做重复实验时，可能会产生0.005-0.010个吸光度单位的差异。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%。当分析检测数据时，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。

9.干扰及错误来源

粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和 亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。

10.试剂盒包括内容

1.磷酸盐/柠檬酸缓冲液 ———— pH值大约3.5；MTT

2.AAO（坑坏血酸-氧化酶）——每板约17 U AAO

3. PMS 溶液

六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C

基于在一定的反应条件下，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。该方法很方便、快速地测定生物、药物等试样中的维生素C，准确度和重复性均达到令人满意的程度。

1 适用范围

本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。

2 测定原理

染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1 适用范围

测定深色样品中还原型抗坏血酸。

2 测定原理

用定量的 2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。

八.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)

自1965年首次应用于复杂农业样品分析后，因其具 有样品处理简单、分析速度快等优点，逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺 织、农业、食品、药物分析等领域[1，2]。在药物分析中，NIRDRSA可以进行定性 鉴别、定量分析等工作。

维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其药典[3]含量测定方法为碘量法。我 们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理，方法简便，结果可 靠。

这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的 频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息 。由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计 算机技术与化学计量学方法。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用 定标集建立预测模型，然后将预测集作为未知样本，根据预测模型进行预测。

对所选择的谱区范围，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理，对25个样品进行交叉 验证，即选择一个样品，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据，并设光谱主成分数 为1，循环迭代样品数和主成分数，计算预测残差平方和,确定所需主成分数。若主成分选择 过小，会丢失样品信息，过大会造成过度拟合。当主因子为2时，预测残差平方和值最小， 为2.029，故选择主因子数为2，建立最佳PLS校正数学模型。

九 电位滴定法

1.原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.

Pt为指示电极，甘汞作参比电极

E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)

2.原理(具体来说:)

随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。

3.计算式：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%

4.优点：

解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题

用线性电位滴定法分析抗坏血酸,抗坏血酸回收率为99.80％～101.5％,相对标准偏差为0.61％分析维生素C片中的抗坏血酸,相当标示量为98.90％～100.5％,相对标准偏差不大于0.48％,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的.

十 .分光光度法

1. 原理：

维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎

脎在500nm波长有最大吸收

根据样品溶液吸光度，由工作曲线查出VC的浓度，即可求出VC的含量

十一 库仑滴定法

1.原理：库仑滴定法属于恒电流库仑分析。

是在特定的电解液中，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。

2.基本依据－－法拉第电解定律：电解时，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比

即：m=MQ/zF = MI t /zF

3..化学反应：阴极反应： 2H+2e-=H2 阳极反应： 2I-=I2+2e-

4.终点指示：多种方法

(1)化学指示剂－－I2

(2)电位法

(3)双铂极电流指示法

5.计算式：Wvc=MvcQ/zFm样式中： F--- 法拉第常数（96487C）

Z---电极反应中转移的电子数注意：使电解效率100％

6.优点：

1）无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，标定）

2）只需要一个高质量的供电器，计时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制

3）若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间

4）电量容易控制及准确测量；方法灵敏度，准确度较高

5）滴定剂来自电解时的电极产物，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，如Cu＋,Br2,Cl2产生后立即与待测物反应。

7.缺点(难点)：

要求电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100％

8.注：电流效率＝i样÷i总＝ i样÷（ i样＋ i容＋i杂）

因为：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等

十二 紫外快速测定法

原理

维生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。

十三 光电比浊法的原理

原理

在酸性介质中,抗坏铁酸与亚硒酸(H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应.1mol的抗铁酸能将2mol的亚硒酸还原成硒.在一定条件下,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液.当抗铁酸的浓度在0-4mg/25-50ml的范围内,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸.

十四荧光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸,使脱氢抗坏铁酸形成 硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物,它不与邻二苯胺生成荧光化合物.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正

十五 原子吸收间接测定法

原理

这是最近报导的一种Vc测定法，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀，在高速离心机下有效地分离出沉淀，小心洗涤后再经浓硝酸溶解，用原子吸收法测定铜含量，即可推知样品中维生素C的含量。该法实验仪器较昂贵，主要问题是操作过程中反应完全与否，沉淀物洗涤、离心反复多次，极容易带来误差。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，有一定的发展前景。根据试验，发现此法结果偏低，还有待于进一步优化改善。

十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法

本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法。于5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液，混匀，加二次蒸馏水定容至刻度，再充分混匀，在分光光度计上，于520nm处测定吸收值，同时作空白试验。本发明测定方法简单、快捷，所用仪器价廉，试剂易得

十七 L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的方法

研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备方法和其电化学行为，并用于维生素C的测定，发现该电极对VC有明显的电催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰，峰电流与VC的浓度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范围内呈良好的线形关系，相关系数为0.9962，其最低检测限可达1.0×10-6mol/L，与紫外光谱法测定的结果一致。

测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧化剂。

十八 梅特勒-托利多仪器法

传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定的实验方法。

除此之外，还有双光束剩余染料差减比色法，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法、聚中性红修饰电极方法、示波溴量法、流动注射化学发光抑制法、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测方法、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的方法等。在此不做介绍。

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